用户亲证:西湖大学开发ProteanFect高效转染小鼠原代T细胞、NK细胞及γδT细胞
西湖大学创新破局
基于天然生物学机制,实现高效基因递送
小鼠原代免疫细胞的基因转染长久以来都是一道难题。转染效率低、细胞死亡率高等问题始终困扰着科研人员。现有的基因递送方法,包括慢病毒、腺病毒、电转以及脂质体等,都无法实现在这些原代免疫细胞中高效且安全的基因递送,极大地制约了相关研究的进一步深入。
最近,西湖大学与西湖凝聚体研究团队成功研发了全球首个基于内源蛋白凝聚体的转染试剂——ProteanFect,为这一难题带来了新的解决方案 【图6】 。作为新一代非病毒、非电转、非脂质体的转染试剂,ProteanFect 基于天然生物学机制,在多种原代细胞中实现了高效的基因递送。
最近一批使用者纷纷反馈ProteanFect在小鼠原代免疫细胞上转染的高效率。我们在这里也给大家分享他们的心得体会与喜悦:
一)清华大学免疫所、中山大学肿瘤防治中心:颠覆对原代T细胞转染的认知
清华大学免疫所与中山大学肿瘤防治中心的科研人员在使用ProteanFect Max后,分别成功将GFP mRNA或多个目的基因片段转染至小鼠 T 细胞。他们表示:这个真的颠覆了我们之前对T细胞转染的认知,非常棒的试剂!
图1:清华大学免疫所的研究者使用ProteanFect Max在小鼠原代T细胞中实现令人惊艳的转染效果
图2:ProteanFect在小鼠原代T细胞中转染多个目的基因结果反馈
二)澳门大学:突破原代NK细胞转染的多年瓶颈
自然杀伤(NK)细胞是天然免疫系统重要部分,其生物学特性使传统转染法难起效。澳门大学用户曾长期在小鼠原代NK细胞转染方面有科研瓶颈。使用ProteanFect Max后成功转染小鼠NK细胞,她激动反馈:“我转不上小鼠 NK 很久了,这次终于成功了,转染后的光很明显,我非常高兴,这是我多年来第一次在转染 NK 细胞上取得这样的成果!”ProteanFect转染试剂盒基于独特原理,有效克服了小鼠原代NK细胞转染难题。
图3:ProteanFect在小鼠原代NK细胞中转染EGFP mRNA结果反馈
三)暨南大学:γδT细胞转染的惊喜成效
暨南大学的研究者在对γδT细胞转染EGFP mRNA实验中,证实了ProteanFect的高效核酸递送性能。需要注意的是,γδT细胞属于高度难转染的原代细胞,对此研究者表示:“慢病毒、腺病毒我们都尝试过了,之前根本无法实现转染。” 然而,使用ProteanFect试剂盒转染后的γδT细胞却呈现出了较高的转染效率。
图4:使用ProteanFect Max在小鼠原代γδT细胞中实现高效转染
什么是ProteanFect?
ProteanFect系列转染试剂盒的成功研发,源于对细胞内生物凝聚体(biomolecular condensates)的深刻认知。生物凝聚体作为细胞内的一种特殊无膜细胞器,由蛋白质、RNA和脂质等多种生物大分子通过液-液相分离(liquid-liquid phase separation)而形成(图5)。它在细胞中能够快速自组装,并参与多种重要的生物过程。有研究指出,早期的遗传信息分子如RNA很可能在这些生物凝聚体中诞生,为生命的起源提供了关键支持。
图5:有膜细胞器与无膜细胞器
生物凝聚体的形成与一类哺乳动物内源蛋白密切相关,这类蛋白具备和核酸高效自组装的特性。基于这样的研发背景,科研人员对一种哺乳动物内源蛋白进行了工程化改造,进而得到了ProteanFect。ProteanFect蛋白分子与核酸高效形成高度规律的球体结构复合物。该复合物可高效进入小鼠原代免疫细胞,快速释放核酸分子以实现基因表达。在完成基因递送使命后,复合物会天然降解其余蛋白成分,从而极大地降低对细胞的毒性。
图6:ProteanFect核酸递送原理示意图
结语
ProteanFect转染试剂盒在小鼠原代T、NK以及γδT细胞转染方面所呈现出的出色表现,不过是其优异性能展示的开端而已。于实际应用场景下,该试剂盒于其他诸多类型的原代细胞以及那些向来被视作难转染的细胞系开展的转染实验里,同样彰显出了极为卓越的性能。其中涵盖了多种肿瘤细胞、造血干细胞等等不同种类的细胞。由此可见,ProteanFect转染试剂盒无疑具备着极为广泛的应用前景。
展望未来,我们相信ProteanFect转染试剂盒将为生物医学研究带来更多的突破和创新。2024年,我们还将推出限定折扣活动,为广大科研人员提供更优质、更实惠的产品和服务。
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